Waters液相色譜柱在使用前,先進行柱的性能測試,并將結果保存起來,作為今后評價柱性能變化的參考。在做柱性能測試時要按照色譜柱出廠報告中的條件進行,只有這樣,測得的結果才有可比性。
本產品可適用范圍廣,從極性化合物到非極性化合物都可獲得良好的分離,在碳水化合物如低聚糖、苷類糖化學,生藥學和天然產物化學,生物物質如多肽、蛋白、核酸等多個領域發(fā)揮重要作用。
Waters液相色譜柱選擇的條件是什么?可以從下面這些方面考慮。
1、填料基質
1)硅膠基質:純度高本錢低,強度大,化學修飾輕易,但pH值范圍有限。大多硅膠基質填料在pH2-8之間穩(wěn)定,但經過特殊修飾的硅膠鍵合相可以穩(wěn)定在pH1.5-10。
2)聚合物基質:應用pH值范圍寬,溫度穩(wěn)定(高溫可以達到80度以上),機械強度小。
2、顆粒外形
大多現(xiàn)代HPLC填料都是球形顆粒,但有時是不規(guī)則的顆粒。球形顆粒提供較低的柱壓、較高的柱效和穩(wěn)定性以及較長的柱壽命在使用高粘度的活動相時;不規(guī)則顆粒有較大比表面積和相對低廉的價格。
3、顆粒粒徑
粒徑越小柱效越高、分離度越高,但同時會導致較高柱壓降。選擇1.5-3μm的填料以解決一些復雜樣品,UPLC可以使用1.5μm的填料;另外10μm或更大粒徑的填料用作半制備或制備柱。
4、含碳量
含碳量指的是硅膠表面鍵合相的比例,與比表面積和鍵合覆蓋度等有關。高含碳量進步柱容量、分辨率及分析時間,用于要求高分離度的復雜樣品;低含碳量分析時間短、展現(xiàn)不同的選擇性,用于快速分析簡單樣品及需要高含水活動相條件的樣品。一般C18的含碳量在7-19%不等。
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