氨基液相色譜柱其固定相是以超純?nèi)嗫浊蛐喂枘z為基質(zhì),通過采用*的固定相鍵合技術(shù),使用含有氨基丙基官能團(tuán)的有機硅烷鍵合而成,能比硅膠柱更快達(dá)到平衡,對流動相的水含量沒有硅膠柱敏感。適用于大多數(shù)正相色譜的應(yīng)用,還可作為HILIC親水作用色譜的固定相,可用于極性化合物的正相分析,弱陰離子交換以及含水的反相液相分析。
色譜柱是色譜分析過程中重要的部分,相當(dāng)于人體的“心臟”。根據(jù)自己要分析的樣品去選擇合適的液相色譜柱,需要考慮不同參數(shù)將會造成什么影響,比如粒徑、酸堿性、極性和分子量大小等。即使是液相色譜柱也分很多類型,比如正相、反相、C18柱、親水性色譜柱等等。只有了解影響分析柱性能的因素,才能結(jié)合目標(biāo)分析物的性質(zhì)、需要達(dá)到的分析效果及實驗室條件來選擇適合的色譜柱。
在設(shè)定選擇樣品分析的HPLC方法時,首先需要根據(jù)化合物的分子量大小,極性大小等因素選擇合適的分離模式,在適當(dāng)?shù)姆蛛x模式下去選擇合適的色譜柱及流動相。
影響氨基液相色譜柱性能的因素有哪些呢?
1、硅膠純度
硅膠純度對峰形有很大液相,硅膠雜質(zhì)和殘留的金屬離子會影響樣品的峰形,如果硅膠表面的金屬含量高會影響堿性化合物的峰形,易發(fā)生拖尾。恒譜生USHAC18色譜柱以全覆蓋的鍵合硅膠為填料,具有優(yōu)異的穩(wěn)定性、重復(fù)性、高選擇性和高分離度等特點。
2、顆粒形狀及粒徑
球形顆粒柱效高、重現(xiàn)性好、柱床結(jié)構(gòu)均勻;不規(guī)則的顆粒柱床結(jié)構(gòu)不均勻、流動相線速度不均勻,容易形成譜帶展寬;平均顆粒直徑,粒徑越小,柱效越高,柱壓也越高。粒徑分布越廣則柱效越低,壓力越大。恒譜生色譜填料均采用球形形狀,列如USHBSil色譜柱采用高純度球形硅膠,金屬雜質(zhì)<10ppm,具有柱效高和峰形好等特點,可用于分離極性和堿性的有機化合物。
3、顆粒表面積
相對而言,高表面積對樣品具有較強的保留能力,更大的柱容量和分離度。而低表面積能更快達(dá)到平衡狀態(tài),更適合梯度洗脫程序。